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基质胶使用指南 - 尊龙凯时科技推荐

发布时间:2025-02-08   信息来源:尊龙凯时官方编辑

Matrigel基质是一种重要的细胞培养材料,其特性主要体现在色差变化上,从淡黄色到深红色,此现象是由于酚红和碳酸氢盐与CO2的反应所致。然而,与5% CO2平衡后,色差会显著减少。冻融后,轻轻摇晃试剂瓶可以使Matrigel均匀分散。所有操作必须在无菌环境中进行,试剂瓶的瓶盖可以用70%乙醇消毒,并自然晾干。为了确保Matrigel呈现均匀的浆状,建议使用预冷的移液器。

基质胶使用指南 - 尊龙凯时科技推荐

细胞可以在0.5mm厚的Matrigel基质层表面生长,亦可以在1mm厚的Matrigel三维基质内进行生长。但需注意的是,过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层,该层适合细胞贴壁,但不适用于细胞的分化研究。特别提示:冻融后的Matrigel应分装于多个预冷的冻存管中,快速冷冻并保存,以避免多次冻融的影响。

Matrigel在22-35°C之间迅速成胶,因此推荐在4°C冰浴中过夜冻融(在4°C时,温度升高会导致部分成胶)。所有相关用品在使用前应提前放置于冰浴中,并必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作Matrigel。在成胶后,Matrigel可在42-48小时后重新呈液态。

尊龙凯时推荐的包被与成胶方法分为薄胶成胶和厚胶成胶。薄胶成胶方法如下:

  1. 冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质,使其呈均匀浆状。
  2. 将需要使用的培养板置于冰上,加入浓度为50μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
  3. 在37°C下放置30分钟后即可使用。

而厚胶成胶方法则是:

  1. 冻融后,同样用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质。
  2. 将需要使用的培养板置于冰浴中,将细胞与Matrigel基质混合,并用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为150-200μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
  3. 在37°C下放置30分钟即可成胶。添加细胞培养基质,也可使细胞直接在胶表面生长。

最后,薄层包被方法适用于多种实验需求:

  1. 冻融后,用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质。
  2. 根据实际需要,采用无血清培养基稀释Matrigel,以确定最佳包被浓度。
  3. 将稀释后的Matrigel包被于需要的培养器皿中,确保覆盖整个器皿的生长表面,并在室温下孵育1小时。

在使用尊龙凯时品牌的Matrigel时,务必遵循上述操作规范,以保证细胞培养的成功与稳定性。