尊龙凯时推出的间充质干细胞成骨诱导分化试剂盒,产品货号为YJ-MSCYD-002,规格包含100ml和200ml,售价为12800元。该试剂盒经过团队精心优化,旨在增强间充质干细胞向成骨细胞的分化能力。请注意,产品仅限于科研用途,不得用于诊断、治疗、临床、家庭或其他用途。
产品组成及保存条件
- 诱导分化添加剂:5mL(100mL规格)/10mL(200mL规格),-20℃保存,有效期1年
- 优质胎牛血清:10mL(100mL规格)/20mL(200mL规格),-20℃保存,有效期1年
- 细胞基础培养基:85mL(100mL规格)/170mL(200mL规格),4℃保存,有效期1年
- 茜素红染色液:5mL(100mL规格)/10mL(200mL规格),室温保存,有效期1年
注意事项:
1. 为确保产品的有效性,避免反复冻融。
2. 配制好的诱导培养基需在2-8℃保存,有效期为2周,请根据实验需求合理配制。
产品使用说明
1. 配制间充质干细胞成骨诱导分化完全培养基:
① 在室温下融化添加剂和血清(注意:若添加剂或血清中含有沉淀物,属于正常现象,无需过滤,以免造成成分损失)。
② 根据实验需求,在无菌操作台中配制完全培养基,建议每次配制50mL,首先加入细胞基础培养基和胎牛血清,然后加入诱导分化添加剂(配制比例请参考下表)。
配制比例表
| 试剂成分 | 配制比例 | 50mL配制体系 |
|------------------|---------|-------------|
| 诱导分化添加剂 | 5% | 2.5mL |
| 优质胎牛血清 | 10% | 5mL |
| 细胞基础培养基 | 85% | 42.5mL |
2. 间充质干细胞成骨诱导分化实验步骤:
① 包被细胞培养瓶/板:向培养器皿中加入0.1%明胶溶液,轻轻晃动使其完全覆盖,然后在37℃培养箱中孵育30分钟,吸去多余液体。
② 取第3~5代、纯度达90%以上的健康间充质干细胞,消化收集后,用含有10%FBS的完全培养基调整细胞浓度,均匀铺于包被好的培养瓶/板中,在37℃、5%CO2的培养箱中培养。
③ 当细胞汇合度达到约90%时,可进行诱导分化。
④ 小心吸弃细胞培养上清,缓慢沿孔壁加入提前配制好的诱导分化完全培养基,并在37℃培育。(注意:完全培养基在使用前需预热至37℃)。
⑤ 每2~3天更换一次新鲜的诱导分化完全培养基。如培养上清颜色变为澄清的黄色,请及时缩短更换周期。
⑥ 细胞诱导2~4周后,可进行茜素红染色鉴定(请在显微镜下确认钙结节形成后,再进行染色)。
3. 茜素红染色分析:
① 细胞诱导分化结束后,小心吸去上清,使用1×PBS冲洗1-2次,室温下固定30分钟。
② 吸去细胞固定液,再用1×PBS冲洗2次。沿孔壁缓慢加入茜素红染色液,染色30分钟(注意:染色液底部可能有沉淀,取用时尽量避免触及底部)。
③ 吸出染色液并用1×PBS冲洗,去掉浮色,最后在显微镜下观察细胞的染色效果,钙盐呈较深的橙红色。
质量控制
- 无菌检测(包括细菌、真菌和支原体检测)
- pH测试
- 渗透压检测
- 内毒素检测
注意事项:
该试剂盒仅限于科研使用,培养体系中的一些组分可能对人体健康有害,避免直接接触。如不慎接触,请立即用自来水冲洗。
选择尊龙凯时的间充质干细胞成骨诱导分化试剂盒,助力您的科研工作,确保高效与安全。