尊龙凯时干扰素诱导蛋白10 (IP-10) ELISA试剂盒使用指南
检测原理
本试剂盒运用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,向预先包被抗体的微孔中依次加入样本、标准品和HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。TMB在过氧化物酶的催化下,转化为蓝色,随后在酸性环境中转为最终的黄色。显色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。最终,在450nm波长下用酶标仪测定吸光度(OD值),可计算出样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热源及内毒素的试管,操作时尽量避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。3000转离心30分钟,取上清。
3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水并捣碎,随后3000转离心10分钟,取上清。
5. 保存:如未能及时检测样本,请按一次用量分装并储存于-20℃,以避免反复冻融。样本在室温下解冻时,确保其充分均匀。
操作注意事项
本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液需按1:20进行稀释,方法为:将1份的20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水中进行稀释。
结果判断
绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,并按照曲线方程计算各样本的浓度值。此过程将帮助您更准确地评估样本中的adropin(AD)水平。
免责声明
尊龙凯时强调,本试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。请确保遵循上述说明以获得最佳实验结果。