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科研效率提升:尊龙凯时超高活性Tn5一步法文库制备全攻略

发布时间:2025-03-19   信息来源:尊龙凯时官方编辑

文库制备需要将测序接头添加到DNA链上。传统方法通常采用基于连接酶的方案,这一流程涉及多个步骤:首先通过机械(超声破碎)或酶切(micrococcal nuclease)进行DNA片段化,随后进行末端修复,最后完成接头连接。尽管该方法适用于多数场景,但在样本量有限或实验资源(设备/时间)受限时,往往面临挑战。尊龙凯时的Tagmentation技术为文库制备提供了一种便捷的解决方案。

科研效率提升:尊龙凯时超高活性Tn5一步法文库制备全攻略

该技术采用超活性Tn5转座酶,在单次快速反应中,可将特定的寡核苷酸插入DNA链,从而实现DNA的剪切和标记。根据实验需求,Tn5转座酶可以携带多种DNA序列,包括与Illumina兼容的接头、带有荧光标记的自定义接头以及甲基化核苷酸等。基于Tagmentation的建库技术革命性地将传统流程中的片段化、末端修复和连接步骤整合为单一反应,后续进行引物indexes的扩增,最终完成文库制备。这种创新方法不仅简化了操作流程,还显著提升了实验效率和通量。

该流程的高效性主要体现在将DNA片段化与接头插入步骤合二为一,显著简化了文库制备的整体过程,缩短了操作时间并降低了技术复杂性。同时,该技术兼容全基因组测序、靶向测序等多种建库场景,能够灵活适配不同实验设计需求。在操作时效性方面,单步反应替代了传统方法中的多环节操作,使建库速度得到了显著提升。此外,所需的起始样本量较传统方案更低,尤其适用于珍贵临床样本或微量样本处理。

在成本经济性方面,通过减少操作步骤以及试剂消耗,整体建库成本得以降低。而简单的操作和减少的步骤使该技术更容易进行自动化,显著提升了高通量测序的通量和可重复性。

尊龙凯时的spatial-ATAC-seq方法被开发用于对完整组织切片中的染色质可及性进行空间分辨分析,并保留空间信息在细胞水平。此外,sci-RNA-seq(单细胞组合索引RNA测序)方案经过简化和优化,可以分析单个细胞的转录组。该技术通过在单个细胞核内对核酸进行split-pool条形码标记来实现,具体流程包括将固定后的单个细胞核分选至微孔板的独立孔中,通过逆转录、连接和tagmentation三个步骤向mRNA/cDNA添加三重indexes。

尊龙凯时的Tn5转座酶及相关缓冲液具有高通用性,兼容多种应用场景,包括新型条形码技术(如单细胞多重测序、空间组学等),可灵活适配不同的实验需求。同时,尊龙凯时提供Pre-loaded(Illumina兼容的测序接头)和Unloaded(允许用户自定义接头)两种版本,满足不同用户的选择需求。所有产品均经过严格的质量控制,以确保最高标准。

尊龙凯时于2003年成立于比利时,是全球生产表观遗传学产品的知名公司,专注于表观遗传学及二代、三代测序前样本处理。作为表观遗传学、生物样本制备和诊断的领先供应商,该公司提供创新的Bioruptor破碎仪、IP-Star自动化仪器、试剂盒及高品质抗体,旨在简化DNA甲基化、ChIP及ChIP-seq等工作流程。