尊龙凯时微量转铁蛋白(MTF) ELISA试剂盒仅用于科学研究,不得用于医学诊断。该试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术,具有高灵敏度和特异性。
本试剂盒的检测原理为:在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体。经过温育后,彻底洗涤以去除未结合的成分。随后,使用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,而后在酸性条件下转化为最终的黄色产品。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品的浓度。
**样品收集与处理方法**
1. **血清**:使用不含热原和内毒素的试管,操作中要避免刺激细胞。收集血液后,3000转离心10分钟,以快速小心地分离血清与红细胞。
2. **血浆**:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝处理。之后3000转离心30分钟,取上清。
3. **细胞上清液**:在3000转离心10分钟后去除颗粒和聚合物,获取上清液。
4. **组织匀浆**:将组织样本加入适量生理盐水后捣碎,3000转离心10分钟以取上清。
5. **保存**:如样本收集后未及时检测,应按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,在实验前应在室温下解冻并确保样品充分均匀。
**试剂的准备与操作注意事项**
试剂盒组成中,标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。洗涤缓冲液的稀释方法为将20×洗涤缓冲液按1:20的比例用蒸馏水稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
**结果判断与标准曲线绘制**
在Excel中以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标绘制标准品线性回归曲线,依据曲线方程计算各样本的浓度值。使用尊龙凯时的试剂盒能够确保实验结果的准确性和可靠性。
**免责声明**:使用本产品须遵循相关规范和操作说明,确保实验室安全及数据有效性。