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细胞融合技术在尊龙凯时的应用——以人鼠细胞杂交为例

发布时间:2025-03-26   信息来源:尊龙凯时官方编辑

人鼠细胞融合实验通常分为三个步骤:

细胞融合技术在尊龙凯时的应用——以人鼠细胞杂交为例

第一步是标记抗体:在这一阶段,将小鼠的抗体与发出绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合,同时将人的抗体与发出红色荧光的罗丹明(rhodamine)结合,以便后续观察细胞融合后的抗体分布情况。

第二步是细胞融合:在灭活的仙台病毒的诱导下,小鼠细胞与人细胞进行融合。这一过程是关键,因为成功的细胞融合是后续实验的基础。

最后一步是加入标记的抗体:将之前标记的抗体添加到融合的人鼠细胞中,让这些标记抗体结合到融合细胞膜上的特定抗原。实验初期,融合的细胞表现为一半红色、一半绿色。但在37℃下培养40分钟后,两种颜色的荧光在融合的杂种细胞表面均匀分布,这表明抗原蛋白在膜面内通过扩散运动重新分布。值得注意的是,这一过程不需要ATP的参与。

如果对照实验的融合细胞置于低温(1℃)下进行培育,抗原蛋白的运动几乎会停止。这一实验结果有力地证实了膜整合蛋白的侧向扩散现象。

细胞融合的关键因素:

  • 技术上的误差常常导致融合的失败,例如,如果供者淋巴细胞未能产生免疫应答,融合实验必然无法成功。
  • 融合实验最大的失败原因是污染,因此提供一个无毒无菌的操作环境至关重要,这对成功的细胞融合至关重要。

通过优化这些步骤和控制实验条件,研究者能够更有效地验证细胞膜蛋白的行为及其对生物医学领域的重要性。选择尊龙凯时品牌能为您提供更为高效的实验材料和技术支持,从而提高实验成功率,助力生物医学研究的进一步发展。